培養基配方
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                                  大腸菌群顯色培養基
                                  Coliform Chromogenic Medium


                                  用途:用于快速、準確檢測大腸菌群,培養24小時,大腸菌群顯藍綠色
                                  應用范圍:大腸菌群顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸菌群的快速檢測。大腸菌群顯藍綠色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。
                                  配方(g/L):
                                   特殊營養物質

                                    34.55

                                   顯色劑

                                   0.35

                                   瓊脂 

                                   13.0

                                   pH 7.0-7.2  25℃

                                  此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。

                                  用法:
                                    稱取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶,121℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心,傾入冷卻至 45-50℃ 培養基約 15ml,混勻,凝固后,36℃ 倒置培養 18~24h。
                                    或冷卻至 45-50℃ 時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固后,在 37℃ 的培養箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養基上,36℃ 培養 18~24h。
                                  操作步驟:
                                    1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
                                    2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
                                    3、36℃ 培養 18~24 h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群菌落。大腸菌群典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
                                    總大腸菌群=藍綠色菌落;
                                    4、對可疑大腸菌群菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上,36℃ 培養 12-16 小時,挑取單菌落做大腸菌群 BGLB 發酵試驗。
                                  質量控制:
                                    1、外觀
                                    此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養基。
                                    2、微生物試驗
                                    在 36℃ 培養 18~24h 小時: 

                                   質控菌株

                                   ATCC

                                   生長情況

                                   菌落顏色

                                   單增李斯特氏菌

                                  19114

                                  -/+

                                  無色

                                   金黃色葡萄球菌

                                  25923

                                  -/+

                                  無色

                                   大腸桿菌

                                  25922

                                  +++

                                  藍色

                                   沙門氏菌

                                  14028

                                  +++

                                  無色

                                  陰溝腸桿菌

                                  23355

                                  +++

                                  藍色

                                   產氣腸桿菌

                                  35029

                                  +++

                                  藍色

                                  弗氏檸檬酸鹽桿菌

                                  43864

                                  +++

                                  藍色

                                  肺炎克雷伯氏菌

                                  10031

                                  +++

                                  藍色

                                  方法的局限性:
                                    本培養基鑒定大腸菌群,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。
                                  典型特征:
                                    大腸菌群典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
                                  貯存:
                                    制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
                                  失效:
                                    干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
                                  注意:
                                    此培養基僅供實驗室使用。
                                  參考文獻:
                                    1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate  in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli.  J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
                                    2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases.  Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976). 
                                    3、LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bact riologique, en particulier des Enterobacteriaceae.  Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102; 267-277 (1962).

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