培養基配方
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                                  李斯特氏菌顯色培養基
                                  Listera Chromogenic Medium


                                  用途:用于李斯特氏菌的顯色培養,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環

                                  應用范圍:李斯特氏菌顯色培養基是青島高科園海博生物技術有限公司研制,可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結果可在3天內檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍色,菌落周圍有一不透明環。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。

                                  配方(g/L):
                                   營養物質

                                    70.0 

                                   顯色劑

                                    6.0 

                                   pH 7.2±0.2  25℃

                                    李斯特氏菌添加劑6.0g、李斯特氏菌抑菌劑(凍干粉)1ml*5支 (已配套,無需另購)
                                    此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。   

                                  用法:
                                    稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動 1-2min,使其混合均勻,將二者分別于 121℃ 高壓滅菌 15 min。冷至 50℃ 左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入復溶后的李斯特氏菌抑菌劑1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 2-3mm,這樣有利觀察不透明環。
                                  操作步驟:
                                    使用前,把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。
                                    1、按SN標準、GB標準、FDA標準、ISO標準或其它標準制備樣品液;
                                    2、把樣品液加入李氏增菌肉湯(LB1、LB2)中增菌;或把樣品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混勻,30℃ 培養 24 小時;或其它增菌液中增菌培養;
                                    3、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上,36℃±1℃ 培養 24-48 小時。
                                  質量控制:
                                    1、外觀
                                    此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。
                                    2、微生物試驗

                                   質控菌株

                                   ATCC

                                   生長情況

                                   菌落顏色

                                  不透明環

                                  單增李斯特氏菌

                                  19114

                                  +++

                                  藍色

                                  +

                                   綿羊李斯特氏菌

                                   CICC21663

                                  +++

                                   藍色

                                  +

                                   斯氏李斯特氏菌

                                  CICC21671

                                  +++

                                   藍色

                                  -

                                   金黃色葡萄球菌

                                   25923

                                  -

                                   -

                                  -

                                  大腸埃希氏菌

                                   25922

                                   -

                                   -

                                  -

                                  鼠傷寒沙門氏菌

                                   14028

                                   -

                                   -

                                  -

                                  黑曲霉

                                   16404

                                   -

                                   -

                                  -

                                     
                                  典型特征:
                                     單增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 24-28 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 48 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 24-48 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。

                                  貯存:
                                    制備好的固體平板保存于2-8℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃。
                                  失效:
                                    干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

                                  注意:
                                    此培養基僅供實驗室使用。
                                  參考文獻:
                                    1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes.  Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
                                    2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkse.  Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
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                                  羅經理、溫小姐

                                  電話:020-87204426 13711177972

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                                  郵箱:hopebiol@163.com
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